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描寫的是一對(duì)孿生姊妹（胡蝶兼飾）的不同遭遇。妹妹二寶自幼跟隨私販洋槍的父親逃往城市，長大以后被父親送給了軍閥錢督辦做姨太太；姐姐大寶則和母親（宣景琳飾）一起住在鄉(xiāng)下，后來嫁給一個(gè)窮苦的木匠桃哥（鄭小秋飾），父母姊妹不通音訊，彼此不知下落。十多年后，大寶夫婦和母親從鄉(xiāng)下流落到城市。桃哥去做工，大寶拋下未滿月的孩子，到錢督辦的公館去當(dāng)奶媽，她帶的正好是二寶的孩子。二寶作為主婦，對(duì)大寶非常冷淡，甚至因?yàn)榇髮毻饷部崴谱约憾械椒锤?；大寶為了保住飯碗，只好盡心服侍小主人。一天，桃哥干活時(shí)摔傷，無錢醫(yī)治，大寶便懇求二寶預(yù)支一點(diǎn)工錢，但二寶非但不肯，反而打了大寶一記耳光。大寶為了救治丈夫，便竊取了小主人的金鎖片，不巧又被錢督辦的妹妹撞見，大寶失手碰倒花瓶，致使錢妹遭誤傷而亡，大寶即以殺人罪入獄。大寶入獄后，母親前來探監(jiān)，才發(fā)現(xiàn)主辦大寶一案的軍法處長正是遺棄自己多年的丈夫。丈夫在妻子的憤怒斥責(zé)和要求下，安排妻子和大寶、二寶會(huì)面。真相大白后，二寶終于為母親和姐姐的苦難遭遇所感動(dòng)，不顧父親勸阻，帶領(lǐng)她們驅(qū)車前往錢督辦處求情。                                    
                               1934年，《姊妹花》被評(píng)選為最佳有聲片；1935年，《姊妹花》曾和《漁光曲》等影片一起被推薦參加莫斯科電影節(jié)展映。